Immunofluorescence Analysis of Estrogen and Progesterone Receptors and Ki-67 Nuclear Protein in Canine Uteri Treated with Medroxyprogesterone Acetate During Anestrus / Análisis de Inmunofluorescencia de Receptores de Estrógeno y Progesterona y Proteína Nuclear Ki-67 en Úteros Caninos Tratados con Acetato de Medroxiprogesterona Durante el Anestr

SUMMARY: Estradiol and progesterone receptors play an essential role in the changes occurring in the uterus during the estrus cycle in dogs (Canis lupus familiaris). In order to investigate the potential effect of progestational agent medroxyprogesterone acetate (MPA) when is used during anestrus on the expression of estradiol receptors [ER], progesterone receptors [PR] and nuclear protein Ki67, we evaluated uterine tissue immunohistochemically. Uteri were grouped as nulliparous (control, n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5mg/kg; i.m.). The amount and location of PR, ER and Ki67 were studied on the epithelial surface, apical and basal regions of the endometrium and myometrium using immunohistochemical techniques with a spectral confocal microscope and analyzed by ANOVA. Differences in ER were observed between the multiparous and MPA-treated groups in the apical region of the endometrium (p=0.0022). Differences in cell proliferation were detected between the nulliparous and multiparous groups (p=0.0037) and nulliparous and MPA-treated groups (p=0.0003) in the basal region of the endometrium. In conclusion, two doses of MPA (5mg/kg; i.m.) do not have a significant effect on the expression of ER and PR; however, they inhibit cell proliferation in the basal region of the endometrium, which includes the stroma, subepithelial cell layer, compact layer, and spongy layer. The clinical and long-term effect of this treatment should be evaluated in subsequent studies.

Los receptores de estradiol y progesterona juegan un rol fundamental en los cambios que se producen en el útero durante el ciclo estral de las perras (Canis lupus familiaris). El objetivo de este estudio fue evaluar las expresiones de ER-a y PR en el útero y la proliferación de células endometriales detectando la expresión nuclear de la proteína Ki67 en perras expuestas a la progestina sintética MPA y compararlas con perras nulíparas y multíparas expuestas a progesterona luteal. Úteros fueron agrupados como nulíparas (control, n=11), multíparas (n=11) y tratadas con MPA (n=11; nulíparas con dos tratamientos; 5 mg/kg; i.m.). La expresión de PR, ER-a y Ki67 fue evaluada en la regiones apicales y basales del endometrio y miometrio con un microscopio confocal espectral. Se observó diferencias en ER-a entre los grupos multíparas y tratados con MPA en la región apical del endometrio (p=0,0022). Se detectaron diferencias en la proliferación celular entre los grupos de nulíparas y multíparas (p=0,0037) y los grupos de nulíparas y tratados con MPA (p=0,0003) en la región basal del endometrio. En conclusión, dos dosis de MPA (5mg/kg; i.m.) no tienen un efecto significativo sobre la expresión de ER y PR; sin embargo, inhiben la proliferación celular en la región basal del endometrio, el cual incluye a estroma, capa de células subepiteliales, estratos compacto y esponjoso. El efecto clínico a largo plazo de este tratamiento debe ser evaluado en estudios posteriores.

Scaffolds Vasculares Descelularizados Provenientes de Vasos Sanguíneos de Placenta Bovina / Decellularized Vascular Scaffolds Derived from Bovine Placenta Blood Vessels

Resumo Fundamento As doenças associadas ao aparelho circulatório são as principais causas de morbidade e mortalidade em todo o mundo, implicando a necessidade de implantes vasculares. Assim, a produção de biomateriais vasculares tem se mostrado uma alternativa promissora às terapias utilizadas em estudos e pesquisas relacionados à fisiologia vascular. Objetivos O presente projeto visa ao desenvolvimento artificial de vasos sanguíneos pela recelularização de scaffolds vasculares derivados de vasos placentários bovinos. Métodos A superfície corioalantoide da placenta bovina foi utilizada para produzir biomateriais descelularizados. Para a recelularização, 2,5 x 104 células endoteliais foram semeadas acima de cada fragmento de vaso descelularizado durante três ou sete dias, quando a cultura foi interrompida e os fragmentos foram fixados para análise de adesão celular. Biomateriais descelularizados e recelularizados foram avaliados por histologia básica, microscopia eletrônica de varredura e imuno-histoquímica. Resultados o processo de descelularização produziu vasos que mantiveram a estrutura natural e o conteúdo de elastina, e não foram observadas células e gDNA remanescentes. Além disso, células precursoras endoteliais se ligaram ao lúmen e à superfície externa do vaso descelularizado. Conclusão nossos resultados mostram a possibilidade de usos futuros desse biomaterial na medicina cardiovascular, como, por exemplo, no desenvolvimento de vasos artificiais.

Background Diseases associated with the circulatory system are the main causes of worldwide morbidity and mortality, implying the need for vascular implants. Thus, the production of vascular biomaterials has proven to be a promising alternative to therapies used in studies and research related to vascular physiology. Objectives The present project aims to achieve the artificial development of blood vessels through the recellularization of vascular scaffolds derived from bovine placental vessels. Methods The chorioallantoic surface of the bovine placenta was used to produce decellularized biomaterials. For recellularization, 2.5 x 104 endothelial cells were seeded above each decellularized vessel fragment during three or seven days, when culture were interrupted, and the fragments were fixed for cell attachment analysis. Decellularized and recellularized biomaterials were evaluated by basic histology, scanning electron microscopy, and immunohistochemistry. Results The decellularization process produced vessels that maintained natural structure and elastin content, and no cells or gDNA remains were observed. Endothelial precursor cells were also attached to lumen and external surface of the decellularized vessel.Conclusion: Our results show a possibility of future uses of this biomaterial in cardiovascular medicine, as in the development of engineered vessels.

Development of an interactive multidisciplinary platform for the bovine neuroanatomy study / Desarrollo de una plataforma interactiva multidisciplinar para el estudio de la neuroanatomía bovina

SUMMARY: The anatomy study is part of the basic cycle of disciplines that composes Veterinary Medicine college curriculum, and its comprehension is essential for other courses subject understanding. However, the current student's profile, the reduced time frame of superior education programs, and the multidisciplinary approach nowadays have made anatomy teaching method outdated and ineffective. Addressing the problem we developed an interactive and multidisciplinary platform based on the blended learning methodology, which could serve as a valuable tool for bovine neuroanatomy comprehension. To produce a new study tool, photos from bovine specimens fixed in formaldehyde, platinated brain pieces sectioned in a metameric order, as well as histological slides of the bovine central nervous system were used. These materials were applied to photos and schemes production, that were correlated with image exams correlation, as well as written content and videotaped classes. The obtained content was compiled into a digital platform, that can serve as an effective additional method to bovine central nervous system study. Furthermore, our results serve as a guide for the development of other blended learning methodologies in veterinary medicine and anatomy teaching. The platform provides a great tool for those who wish to accomplish a better understanding of bovine neuroanatomy and its clinical, surgical and image diagnosis correlations.

El estudio de la anatomía forma parte del ciclo básico de disciplinas que componen el currículo de la facultad de Medicina Veterinaria, y su comprensión es fundamental para el entendimiento de las materias de otros cursos. Sin embargo, el perfil del estudiante actual, la reducción de los tiempos de los programas de educación superior y el enfoque multidisciplinario actual han hecho que el método de enseñanza de la anatomía sea obsoleto e ineficaz. Abordando el problema desarrollamos una plataforma interactiva y multidisciplinar basada en la metodología blended learning, que podría servir como una valiosa herramienta para la comprensión de la neuroanatomía bovina. Para producir una nueva herramienta de estudio, se utilizaron fotografías de especímenes bovinos fijados en formaldehído, piezas de cerebro plastinadas y seccionadas en un orden metamérico, así como láminas histológicas del sistema nervioso central bovino. Estos materiales se utilizaron en la producción de fotos y esquemas, que se correlacionaron con exámenes de imágenes, así como contenido escrito y clases grabadas en video. El contenido obtenido se compiló en una plataforma digital, que puede servir como un método adicional y eficaz para el estudio del sistema nervioso central bovino. Además, nuestros resultados sirven como guía para el desarrollo de otras metodologías de aprendizaje semipresencial en la enseñanza de la medicina veterinaria y la anatomía. La plataforma proporciona una gran herramienta para aquellos que deseen lograr una mejor comprensión de la neuroanatomía bovina y sus correlaciones clínicas, quirúrgicas y de diagnóstico por imágenes.

Ursolic acid increases strength in mdx mice model and may decrease fibrosis deposition by tgf-ß downregulation / El ácido ursólico aumenta la resistencia en el modelo de ratones mdx y podría disminuir la deposición de fibrosis mediante la regulación decreciente de tgf-ß

SUMMARY: Dystrophin disfunction results in sarcolemma destabilization, leading muscle cell damage by continuous degeneration cycles and limited regeneration. In muscle dystrophy, caused by dystrophin dysfunction, inflammation, necrosis and fibrosis are pathophysiological muscle function loss characteristics. As a genetic disease, this muscle dystrophy has no cure, however, advances in drug therapy using glucocorticoids can decrease the disease progression. Subsequently, alternative therapies were studied, such as ursolic acid (UA), that inhibits muscle atrophy and increases muscle mass and strength. Herein, we used 10 mg/kg daily supplementation in mdx mice for 4 weeks to evaluate serum creatine phosphokinase (CPK), muscle strength (Kondziela test), muscular organization (histology) and expression of fibrosis related genes (TGF-ß, TNF-α, mstn and ostn). UA supplementation increased muscle morphological organization, motor strength and decreased muscular TGF-ß expression. Altogether, the gene expression profile, histological organization and strength could suggest that UA treatment did not stop the fibrogenesis but decreased its progress.

RESUMEN: La disfunción de la distrofina resulta en la desestabilización del sarcolema, llevando al daño de las células musculares por ciclos continuos de degeneración y regeneración limitada. En la distrofia muscular, debido a la disfunción de la distrofina, la inflamación, la necrosis y la fibrosis, son características fisiopatológicas de la pérdida de la función muscular. Como enfermedad genetica no es possible remediar esta distrofia muscular, sin embargo, los avances en la terapia de medicamentos con glucocorticoides pueden disminuir la progresión de la enfermedad. Se estudiaron terapias alternativas, como el ácido ursólico (UA), que inhibe la atrofia muscular y aumenta la masa y la fuerza muscular. En este estudio, utilizamos una suplementación diaria de 10 mg / kg en ratones mdx durante 4 semanas para evaluar la creatina fosfoquinasa (CPK) sérica, la fuerza muscular (prueba de Kondziela), la organización muscular (histología) y la expresión de genes relacionados con la fibrosis (TGF-ß, TNF- α, mstn y ostn). La suplementación con AU aumentó la organización morfológica muscular, la fuerza motora y la disminución de la expresión muscular de TGF-ß. El perfil de expresión génica, la organización histológica y la fuerza simultáneamente podrían sugerir que el tratamiento con AU no detuvo la fibrogénesis sino que disminuyó su progreso.

Veterinary anatomy during the COVID-19 pandemic in brazil: research focused on pedagogical practice / Anatomía veterinaria durante la pandemia COVID-19 en brasil: investigación centrada en la práctica pedagógica

SUMMARY: Since the first Brazilian Veterinary Medicine course in 1910, many curricular changes have taken place. The pedagogical project have been centered on the student as a subject of learning and supported by the professors as a critical mediator of this process and the pandemic of COVID-19 accelerated this change. Many professors have taught video lessons to ensure continuity of teaching, research and extension, even at a distance. This paper, therefore, aims at reporting the development of animal anatomy didactic contents applied on online platforms in Portuguese language. To this, eight researches were developed addressing the teaching-learning of Morphological Sciences contents to be incorporated into distance education platforms that focused canine and feline anatomy, the study of neuroanatomy in the ovine, bovine, equine and primate species and the surgical anatomy of the locomotor apparatus of the equine specie. Thus, virtual teaching-learning platform can help, as a complementary tool to face-to-face classes, in obtaining the skills, abilities and attitudes required for the training of veterinary students in Brazil.

RESUMEN: Se han efectuado importantes cambios curriculares desde el primer curso de Medicina Veterinaria de Brasil en 1910. El proyecto pedagógico se ha centrado en el alumno como sujeto de aprendizaje con apoyo de los docentes como mediadores críticos de este proceso; con la pandemia de COVID-19 se aceleró este cambio. Muchos profesores han impartido lecciones en video para garantizar la continuidad de la docencia, la investigación y la extensión, incluso a distancia. Este artículo tiene como objetivo informar sobre el desarrollo de los contenidos didácticos sobre la anatomía animal, aplicados en plataformas online en portugués. Para ello, se desarrollaron ocho investigaciones que abordan la enseñanza-aprendizaje de contenidos de Ciencias Morfológicas para ser incorporados en plataformas de educación a distancia que enfocaran la anatomía canina y felina, el estudio de la neuroanatomía en las especies ovina, bovina, equina y primate, y la anatomía quirúrgica del aparato locomotor de la especie equina. De esta forma, la plataforma virtual de enseñanza-aprendizaje puede complementar las clases presenciales en la obtención de las habilidades y actitudes requeridas para la formación de los estudiantes de veterinaria en Brasil.

Clinical aspects, food management, and clinical evolution of a cat with hypertrophic muscular dystrophy / Aspectos clínicos, manejo alimentar e evolução clínica de um gato com distrofia muscular hipertrófica

Hypertrophic feline muscular dystrophy (HFMD), rarely reported in the literature, is a disease caused by a hereditary recessive dystrophin deficiency linked to the X chromosome, mainly affecting young male cats. Here, we presented the clinical aspects, food management, and clinical evolution of a seven-year-old mixed-breed cat diagnosed with HFMD, having a primary history of progressive tongue protrusion.

A distrofia muscular hipertrófica felina é uma doença causada por uma deficiência da distrofina com caráter hereditário recessivo ligado ao cromossomo X, com poucos registros de ocorrência na literatura, que acomete principalmente gatos machos jovens. Neste trabalho, são relatados os aspectos clínicos, manejo alimentar e evolução clínica de um gato, sem raça definida, de sete anos com histórico principal de protrusão progressiva da língua e diagnosticado com distrofia muscular hipertrófica felina.

Anatomo-histological evaluation of male reproductive system of the juvenile Caiman crocodilus yacare / Evaluación anátomo-histológica del sistema reproductor del Caiman crocodilus yacare macho juvenil

SUMMARY: The Caiman crocodilus yacare was once close to extinction. Studies about the male reproductive tract may aid in their reproduction and conservation. In this work, after sedation and euthanasia, seven young male C. yacare were submitted to necropsy, and macroscopic evaluation of the reproductive system, while the three others were admitted for histological study. The histological sections were stained with Hematoxylin & Eosin and Masson's Trichrome. After opening the pleuroperitoneal cavity it was possible to identify that the testicles were disposed in pairs and attached to its dorsal surface. The epididymis showed elongated and convoluted shapes and were located at the cranial margin of the testicles, following its medial portion, which was the same portion that the "vas deferens" stems from until the opening of the cloaca. The crocodile phallus presented a tubular shape, with conical appearance, displaying little resistance while maintaining its flexibility, compatible with a fibrocartilaginous tissue. On light microscopic analysis it was possible to observe that the testis was delimited by the tunica albuginea. The seminiferous tubules were contorted, and the interstitial space was filled with interstitial tissue and Leydig cells. The epididymal ductus were covered with non-ciliated pseudostratified epithelium with cells varying between cuboidal and prismatic shapes. The ductus deferens were characterized by a narrow girth shrouded with non- ciliated pseudostratified prismatic epithelium. The phallus of the crocodile was covered with a non-keratinized squamous epithelium surrounded by connective tissue. The findings support anatomic and histologic knowledge Alligatoridae reproductive system, enabling further research in the C. yacare reproduction and conservation.

RESUMEN: El Caiman crocodilus yacare ha estado en peligro de extinción. Los estudios sobre el aparato reproductor del macho pueden ser de ayuda en su reproducción y conservación. En este trabajo, fueron sometidos a necropsia y evaluación macroscópica del aparato reproductor, siete machos jóvenes de C. yacare, mientras que otros tres fueron utilizados para su estudio histológico. Las secciones histológicas se tiñeron con hematoxilina y eosina y tricrómico de Masson. Después de examinar la cavidad pleuroperitoneal se pudo identificar que los testículos estaban dispuestos en pares y adheridos a su superficie dorsal. El epidídimo presentaba formas alargadas y contorneadas y se ubicaba en el margen craneal de los testículos, siguiendo su porción medial, que era la misma porción de donde parten los conductos deferentes hasta la apertura de la cloaca. El pene del cocodrilo presentaba forma tubular, de apariencia cónica, mostrando poca resistencia manteniendo su flexibilidad, compatible con un tejido fibrocartilaginoso. En el análisis microscópico óptico se pudo observar que el testículo estaba delimitado por la túnica albugínea. Los túbulos seminíferos estaban contorsionados y el espacio intersticial estaba lleno de tejido intersticial y células intersticiales (células de Leydig). El epidídimo estaba cubierto con epitelio pseudoestratificado no ciliado con células que variaban entre formas cuboideas y prismáticas. Los conductos deferentes se caracterizaron por una circunferencia estrecha envuelta en un epitelio prismático pseudoestratificado no ciliado. El pene del cocodrilo estaba cubierto con un epitelio escamoso no queratinizado rodeado de tejido conectivo. Los hallazgos corroboran el conocimiento de la anatomía del sistema reproductivo de Alligatoridae, lo que permite una mayor investigación sobre la reproducción y conservación de C. yacare.

Gonadal differentiation during embryonic and fetal development of male New Zealand rabbits (Oryctolagus cuniculus) / Diferenciación gonadal durante el desarrollo embrionario y fetal de conejos machos neozelandeses (Oryctolagus cuniculus)

SUMMARY: The rabbit is considered an ideal animal model for studies that describe abnormalities in the testicles due to the similar morphogenetic mechanisms of sexual development and diseases commonly found in humans. The aim of this study was to determine the male sexual differentiation of the New Zealand rabbit (Oryctolagus cuniculus) through development. The gestational age was estimated and classified as 9, 12, 14, 16, 18, 20, 23 and 28 gestational days. The morphological and sexual determination were performed by histological analysis of the reproductive tract in the embryos and fetuses (9-28 days) as well as by immunohistochemistry- Desert hedgehog-Dhh- (testis-specific protein on Y chromosome- 16, 20, 23 days and adult rabbits). Gonads were observed from the 14th day in an undifferentiated stage and with homogeneous aspect. Sexual differentiation was observed from the 16th day with presence of cells forming gonadal cords and Dhh+ cells in the gonadal parenchyma. From the 18th gestational day testicular cords were observed, which evolved into organized seminiferous tubules. The formation of the efferent ducts and ductus deferens and epididymis was observed on the 20th and 23rd days, respectively. The differentiation of the external genitalia occurred from the 23rd days from the anogenital distance and was identified to identify the penile structures. In summary, the features of the sexual differentiation were determined by observation of the Dhh+ protein in embryos from the 16th day to adulthood, and the morphological particularities observed from the 18th gestational day, determined by differentiation of the external genitalia from the 23rd day.

RESUMEN: El conejo se considera un modelo animal ideal para estudios que describen anomalías a nivel testícular debido a que presenta mecanismos morfogenéticos similares al desa- rrollo sexual y enfermedades que se encuentran comúnmente en los seres humanos. El objetivo de este estudio fue determinar la diferenciación sexual masculina del conejo de Nueva Zelanda (Oryctolagus cuniculus) a través del desarrollo. La edad gestacional se estimó y clasificó en 9, 12, 14, 16, 18, 20, 23 y 28 días gestacionales. La determinación morfológica y sexual se realizó mediante análisis histológico del tracto reproductivo en los embriones y fetos (9 - 28 días) así como mediante inmunohistoquímica -Desert hedgehog-Dhh- (proteína testicular específica en el cromosoma Y- 16, 20, 23 días y conejos adultos). Las gónadas se observaron a partir del día 14 en un estadio indiferenciado y con aspecto homogéneo. Se observó diferenciación sexual a partir del día 16 con presencia de células formadoras de cordones gonadales y células Dhh+ en el parénquima gonadal. A partir del día 18 de gestación se observaron cordones testiculares, que evolucionaron a túbulos seminíferos organizados. La formación de los conductos eferentes, deferentes y del epidídimo se observó a los 20 y 23 días, respectivamente. La diferenciación de los genitales externos ocurrió a partir del día 23 desde la distancia anogenital y se utilizó para identificar las estructuras del pene. En conclusión, las características de la diferenciación sexual se determinaron mediante la observación de la proteína Dhh en embriones desde el día 16 hasta la edad adulta, y las particularidades morfológicas observadas a partir del día 18 de gestación, determinadas por diferenciación de los genitales externos a partir del día 23.

Determination of the relationship among cell proliferation, metabolic activity and stage of pregnancy by AgNORs as markers in bovine placenta / Determinación de la relación entre la proliferación celular, la actividad metabólica y la etapa de preñez por los AgNOR como marcadores en la placenta bovina

SUMMARY: Nucleolus Organizer Regions (NORs) are defined as nucleolar components containing argyrophilic proteins selectively stained by silver methods (AgNORs). Several investigations have shown the AgNOR quantity and area represent a valuable parameter of cell kinetics, since they reflect the level of activity and cellular proliferation. This article addresses an evaluation of the functional activity and relation between days of pregnancy and proliferative capacity of trophoblastic mononucleate and binucleate cells from bovine placentomes. Both the number and size of AgNORs were determined in different phases of gestation by silver nitrate staining in conventional histological slides. The results showed a significant increase (from 1 to 12 AgNORs) in the number of AgNORS per trophoblastic mononucleate cell in the 3rd trimester, with predominance of 4-6 AgNORs/cell. In the 1st and 2nd trimesters, the number ranged between 1 and 9 AgNORs/cell, with predominance of 1-3 AgNORs. No significant differences were observed between the 2nd and 3rd trimesters, but in the first, in binucleate cells (19-27 and 10-18 AgNORs/cell, respectively) - this number was higher than the one registered in trophoblastic mononucleate cells in the same period. Thus, AgNORs can be used as markers of the proliferative placental cell cycle and established a relation between number of AgNORs and days of gestation. This relation can be used for diagnoses and prognoses of several placental pathologies, including pregnancy losses from manipulated embryos.

RESUMEN: Las Regiones Organizadoras de Nucléolos (NOR) se definen como componentes nucleolares que contienen proteínas argirofílicas teñidas selectivamente por métodos de plata (AgNOR). Varias investigaciones han demostrado que la cantidad y el área de AgNOR representan un parámetro importante de la cinética celular, ya que reflejan el nivel de actividad y proliferación celular. Este trabajo analiza la actividad funcional y la relación entre los días de preñez y la capacidad proliferativa de las células trofoblásticas mononucleadas y binucleadas de placentomas bovinos. Tanto el número como el tamaño de los AgNOR se determinaron en diferentes fases de la gestación mediante tinción con nitrato de plata en portaobjetos histológicos convencionales. Los resultados mostraron un aumento significativo (de 1 a 12 AgNOR) en el número de AgNORS por célula mononucleada trofoblástica en el tercer trimestre, con predominio de 4-6 AgNOR / célula. En el primer y segundo trimestre, el número osciló entre 1 y 9 AgNOR / célula, con predominio de 1-3 AgNOR. No se observaron diferencias significativas entre el 2do y 3er trimester; en el primer trimestre, en células binucleadas (19-27 y 10-18 AgNORs / célula, respectivamente) - este número fue superior a la cantidad registrada en células mononucleadas trofoblásticas en el mismo período. Por tanto, los AgNOR se pueden utilizar como marcadores del ciclo celular placentario proliferativo y se establece una relación entre el número de AgNOR y los días de gestación. Esta relación puede ser útil en el diagnóstico y pronóstico de varias patologías placentarias, incluidas las pérdidas de preñeces de embriones manipulados.

Anatomical characteristics of the bones of the thoracic limb of white-eared opossum (Didelphis albiventris) / Características anatómicas de los huesos del miembro torácico de la zarigüeya oreja blanca (Didelphis albiventris)

SUMMARY: The skeleton of the thoracic limb is one of the key aspects for the understanding of the habits and movement of different mammalian species. Considering the gap about studies related to marsupial osteology, this work proposes to study the aspects inherent to the skeleton of opossums, with emphasis on the detailed anatomical description of the bones that form the thoracic limb. For this purpose, the bones of six specimens of possums of the species Didelphis albiventris were used. These small to medium sized marsupials inhabit a wide range of South America, living in several types of habitats, being commonly described as arboreal omnivores and have anthropic habits. For the execution of this study, the bone accidents perceptible in the specimens were identified by superficial palpation, which were then radiographed. The thoracic limb bones were prepared by boiling and drying in the sun. Finally, from the radiographic images and the prepared bones, a detailed description of the anatomy of the bone components of the thoracic limb of Didelphis albiventris was made, joining the previously obtained data of surface anatomy. These data were compared with data from the literature, discussing the functional significance of the osteological findings of the thoracic limb of Didelphis albiventris.

RESUMEN: El esqueleto del miembro torácico es uno de los aspectos clave para el conocimiento de los hábitos y movimientos de las diferentes especies de mamíferos. Considerando los escasos estudios relacionados con la osteología marsupial, este trabajo se propusoestudiar los aspectos inherentes al esqueleto de la zarigüeya, con énfasis en la descripción anatómica detallada de los huesos que forman el miembro torácico. Para ello se utilizaron los huesos de seis ejemplares de zarigüeyas de la especie Didelphis albiventris. Estos marsupiales de pequeño a mediano tamaño habitan una zona amplia de América del Sur, viven en varios tipos de hábitats, se describen comúnmente como omnívoros arbóreos y tienen hábitos antrópicos. Para este estudio se identificaron mediante palpación superficial los accidentes óseos perceptibles en los especímenes, y posteriormente se tomaron imágens radiológicas. Los huesos de los miembros torácicos se prepararon hirviéndolos y secándolos al sol. Finalmente, a partir de las imágenes radiográficas y de los huesos preparados, se realizó una descripción detallada de la anatomía de los componentes óseos del miembro torácico de Didelphis albiventris, uniendo los datos de anatomía superficial obtenidos previamente. Estos datos se compararon con datos de la literatura, discutiendo la importancia funcional de los hallazgos osteológicos del miembro torácico de Didelphis albiventris.

The macro and micro-structure of the celiac and cranial mesenteric ganglia in a long-lived rodent - paca (Cuniculus paca, Linnaeus 1766) / La macro y micro estructura de los ganglios mesentéricos celíacos y craneales en un roedor longevo - paca (Cuniculus paca, Linnaeus 1766)

SUMMARY: The celiac, cranial mesenteric and celiacomesenteric ganglia of the paca (Cuniculus paca) were found between the celiac and cranial mesenteric arteries. Two predominant patterns were found: isolated celiac and cranial mesenteric ganglion and the celiacomesenteric ganglion. At the microscopic level, the ganglia are constituted by an agglomeration of neurons surrounded by capsule of connective tissue. Most of these neurons had a single eccentric nucleus. Satellite cells and mast cells were found around the soma. The mast cells were also found ar ound blood vessels and in the capsule of the ganglia.

RESUMEN: Los ganglios celíacos, mesentérico-craneales y celíaco mesentéricos de la paca (Cuniculus paca) se encontraron entre las arterias celíaca y mesentérica craneal. Se visalizaron dos patrones predominantes: celiaca aislada y ganglio mesentérico craneal y ganglio celiaco mesentérico. A nivel microscópico, los ganglios están constituidos por una aglomeración de neuronas rodeadas por una cápsula de tejido conectivo. La mayoría de estas neuronas tenían un solo núcleo excéntrico. Se encontraron células satélites y mastocitos alrededor del soma. Los mastocitos también se encontraron alrededor de los vasos sanguíneos y en la cápsula de los ganglios.

Ruptura del paradigma: estudio macroscópico del desarrollo embrionario de aves (Gallus gallus domesticus) realizado por métodos complementarios / Paradigm break: macroscopic study of embryonic development of birds (Gallus gallus domesticus) carried out by complementary methods

RESUMEN: El uso de plataformas virtuales se muestra como un nuevo recurso didáctico que posibilita el proceso de enseñanza-aprendizaje de forma dinámica. A grandes rasgos, permite el acceso a imágenes digitales en alta resolución mediante el uso de computadores, smartphones y/o tabletas. Portanto, este trabajo presenta nuestra metodología en el campo de la embriología de aves domésticas y la experiencia adquirida en el desarrollo de recursos para la enseñanza por medio de las tecnologías de la información y comunicación, de gran utilidad hoy en día en medio de la pandemia ocasionada por el nuevo coronavirus.

SUMMARY: Online platforms are a new didactic resource that enable an active teaching-learning process. In general, they allows access to high resolution digital images through the use of computers, smartphones and / or tablets. Therefore, this study presents our methodology in the field of domestic bird embryology and the experience acquired in the development of teaching resources through information and communication technologies, which are very useful nowadays, particularly in the midst of the pandemic caused by the new coronavirus.

The morphology of paca (Cuniculus paca) testis with high dose of letrozole an aromatase inhibitor / La morfología del testículo de paca (Cuniculus paca) con altas dosis de letrozol, un inhibidor de la aromatasa

SUMMARY: The study reported the influence of the high and acute dose of Letrozole on the testis morphology in paca (Cuniculus paca), an aromatase inhibitor that reduces the endogenous estrogen, the essential hormone for spermatogenesis. Morphological changes were observed in seminiferous epithelium with germ cells with apoptotic characteristics and presence of vacuoles and nuclei in pycnose.

RESUMEN: El objetivo de este estudio fue analizar la influencia de una dosis alta de Letrozol en la morfología de los testículos de la paca (Cuniculus paca), un inhibidor de la aromatasa que reduce el estrógeno endógeno, la hormona esencial para la espermatogénesis. Se observaron cambios morfológicos en el epitelio seminífero con células germinales con características apoptóticas y la presencia de vacuolas y núcleos en picnosis.

Comparative anatomy of blue-and-yellow macaw (Ara ararauna) and toco toucan (Ramphastos toco) beaks using macroscopic analysis and computerized tomography / Anatomía comparada de los picos de guacamayo azul y amarillo (Ara ararauna) y de tucán toco (Ramphastos toco) mediante análisis macroscópico y tomografía computarizada

SUMMARY: Clinically, avian medicine still finds it very difficult to treat wild patients due to the lack of reliable information about their anatomy and physiological parameters that make comparative analyzes possible. Considering that computed tomography (CT) is one of the most viable alternatives in radiography of the head, we describe the comparative anatomy of the beak in the Ara ararauna and the Ramphastos toco through this imaging modality and macroscopy analysis, providing additional information about their conformation and topography for clinical exams. Adult specimens of each were dissected after the CT and beaks were removed for macroscopic analyses. The macroscopic and tomographic findings for both species confirm the similarities in beak morphology and the dietary peculiarities of each.The CT scan proved to be a useful tool to visualize internal structures of the skull through a detailed virtopsy of regions that are difficult to access by the usual necropsy with a scalpel.

RESUMEN: Debido a la escasa información de la anatomía y de los parámetros fisiológicos que hacen posible los análisis comparativos en la medicina aviar, clínicamente resulta muy difícil el tratamiento de estos animales. Considerando que la tomografía computarizada es una buena alternativa, estudiamos la anatomía comparativa del pico en Ara ararauna y Toco Toucan utilizando imágenes y un análisis de macroscopía. Estos métodos proporcionaron información adicional referente a su conformación y topografía para el trabajo clínico. Después de analizar la tomografía se disecaron las muestras de especímenes adultos y se retiraron los picos para un análisis macroscópico. Los hallazgos macroscópicos y tomográficos para ambas especies corroboraron la relación morfológica entre los picos y las peculiaridades dietéticas de cada uno. Se demostró además, que la tomografía computarizada es una herramienta útil para visualizar las estructuras internas del cráneo de las aves, a través de una virtopsia detallada en áreas de difícil acceso durante una necropsia habitual.

Equine yolk sac: a stem cells source / Saco vitelino equino: una fuente de células madre

SUMMARY: Mesenchymal stem cells are characterized by in vitro high proliferation and multilineage potential maintenance. This study aimed to isolate and characterize equine YS mesenchymal stem cells and compare these with amniotic membranes. The yolk sac (YS) and amniotic membranes (AM) were obtained from 20 pregnant mares with gestational age around 30 days. Cells were cultured in α-MEM supplemented with 15 % FBS, 1 % antibiotic solution, 1 % L-glutamine and 1 % nonessential amino acids. To cell characterization we used cytogenetic analysis, fibroblast colony-forming unit assays, cell growth curves, immunophenotyping, flow cytometry, differentiation assays and teratoma formation. Results: Both cell sources presented fibroblastoid and epithelioid-like format. The YS cells have lower colony formation potential then AM ones, 3 versus 8 colonies per 103 plated cells. However, YS cells grew progressively while AM cells showed steady. Both, the YS and amnion cells immunolabeled for Oct-4, Nanog, SSEA-3, cytokeratin 18, PCNA, and vimentin. In addition, presented mesenchymal, hematopoietic, endothelial and pluripotency markers in flow cytometry. Discussion: Both cell sources presented high plasticity and differed into osteogenic, adipogenic, and chondrogenic lineages, and no tumor formation in nude mice was observed. The results suggest that horse YS may be useful for cell therapy such as amnion-derived cells.

RESUMEN: Las células madre mesenquimales se caracterizan por una alta proliferación in vitro y un mantenimiento potencial de múltiples líneas. Este estudio tuvo como objetivo aislar y caracterizar las células madre mesenquimales del saco vitelino equinas y compararlas con las membranas amnióticas. Se obtuvo el saco vitelino (SV) y las membranas amnióticas (MA) de 20 yeguas preñadas con edad gestacional de aproximadamente 30 días. Las células se cultivaron en α -MEM suplementado con 15 % de FBS, 1 % de solución antibiótica, 1 % de L-glutamina y 1 % de aminoácidos no esenciales. Para la caracterización celular utilizamos análisis citogenéticos, ensayos de unidades de colonias de fibroblastos, curvas de crecimiento celular, inmunofenotipaje, citometría de flujo, ensayos de diferenciación y formación de teratomas. Ambas fuentes celulares presentaron formato fibroblastoideo y epitelioide. Las células SV tienen un potencial de formación de colonias más bajo que las de MA, 3 versus 8 colonias por 103 células en placa. Sin embargo, las células SV crecieron progresivamente mientras que las células MA se mostraron estables. Tanto las células YS como las células amnios están inmunomarcadas para Oct-4, Nanog, SSEA-3, citoqueratina 18, PCNA y vimentina. Además, presentó marcadores mesenquimales, hematopoyéticos, endoteliales y pluripotenciales en citometría de flujo. Ambas fuentes celulares presentaron alta plasticidad y diferían en linajes osteogénicos, adipogénicos y condrogénicos, y no se observó formación de tumores en ratones. Los resultados sugieren que el SV de caballo puede ser útil para la terapia celular, como las células derivadas de amnios.

Rabbit vomeronasal organ-derivered cells have mesenchymal profile and neuronal commitment / Las células derivadas del órgano vomeronasal del conejo tienen perfil mesenquimatoso y compromiso neuronal

SUMMARY: The vomeronasal organ (VNO) is an accessory organ involved on the olfactory pathway, that detects pheromones and emits signals in order to modulate social and reproductive behavior. The VNO stem cells replace neurons throughout life. The aim of this study was to isolate and characterize cells derived from the vomeronasal organ from New Zealand rabbits. Five male rabbits with 120 days were used for cell isolation and culture. Results: VNO-derived cells presented labelling for proliferation (PCNA), undifferentiated profile (Nanog), neuronal (GFAP), mesenchymal stem cells (CD73, CD90 and CD105 and Stro-1). Also, presence of cytoskeletal (Vimentin, b-tubulin and CK-18) and absence of hematopoietic markers (CD34, CD117 and CD45) both by immunofluorescence and flow cytometry. By PCR it was possible to verify the expression of some undifferentiated profile (Oct-4), neuronal (Nestin) and mesenchymal (CD73, CD105 and Vimentin) genes. Functionally, VNO-derived cells differentiate in vitro into adipocytes, osteocytes and chondrocytes, and presented no tumorigenic potential when injected to Balb/c nu/nu mice. In conclusion, the rabbit VNO-derived cells have a profile that could be supportive to VNO olfactory/neuroreceptor epithelium by delivering factors to epithelial turnover or even by differentiation into epithelial cells to replacement of commissural epithelium.

RESUMEN: El órgano vomeronasal (OVN) es un órgano accesorio de la vía olfatoria, que detecta feromonas y emite señales que afectan la modulación del comportamiento social y reproductivo. Las células madre OVN reemplazan las neuronas durante toda la vida. El objetivo de este estudio fue aislar y caracterizar células derivadas del órgano vomeronasal de conejos raza Nueva Zelanda. Para el aislamiento y el cultivo celular se utilizaron cinco conejos machos con una edad de 120 días. Las células del OVN presentaron etiquetado para la proliferación (PCNA), un perfil indiferenciado (Nanog), neuronal (GFAP), células madre mesenquimales (CD73, CD90 y CD105 y Stro-1). Además, se ob- servó presencia de citoesqueleto (Vimentina, β-tubulina y CK-18) y ausencia de marcadores hematopoyéticos (CD34, CD117 y CD45) tanto por inmunofluorescencia como por citometría de flujo. Me- diante PCR fue posible verificar la expresión de algunos genes de perfil indiferenciado (Oct-4), neuronal (Nestin) y mesenquimatoso (CD73, CD105 y Vimentin). Las células derivadas del OVN se diferencian in vitro en adipocitos, osteocitos y condrocitos, y no presentan un potencial tumorigénico al ser infiltrados en ratones Balb / c nu / nu. En conclusión, las células derivadas de OVN de conejo tienen un perfil que podría ser compatible con el epitelio olfatorio / neurorreceptor de OVN transmitiendo factores al recambio epitelial o incluso mediante la diferenciación en células epiteliales para reemplazar el epitelio comisural.

Characteristics of the equine placenta at first trimester / Características de la placenta equina en el primer trimestre

The equine placenta is a simple apposition of fetal and maternal tissues, becoming more complex with the formation of microcotyledons around days 75 and 100 of gestation. The present study aimed to describe the gross and microscopic morphology of early equine placenta. Embryonic/fetal membranes from thirty-seven mares were submitted to macroscopic description, light, scanning and transmission microscopy. Overall the gross characteristics of membranes were similar with already described for older stages. However, transmission electron microscopy evidenced high metabolic rate in chorion and allantois, and high secretion profile in amnion and even higher in yolk sac. Gene ontologies enrichment, using published data, pointed several common ontologies in allantoic and amniotic fluids, related to oxygen and iron transport, extracellular space and high-density lipoprotein receptor binding. Overall, the morphological and ontology enrichment could indicate allantois and amnion crosstalk.

La placenta equina es una simple aposición de tejidos fetales y maternos, que se vuelve más compleja con la formación de microcotiledones alrededor de los días 75 y 100 de gestación. El presente estudio tuvo como objetivo describir la morfología macroscópica y microscópica de la placenta equina temprana. Las membranas embrionarias / fetales de treinta y siete yeguas fueron sometidas a descripción macroscópica, luz, escaneo y microscopía de transmisión. En general, las características generales de las membranas fueron similares a las ya descritas para las etapas más antiguas. Sin embargo, la microscopía electrónica de transmisión mostró una alta tasa metabólica en corion y alantoides, y un alto perfil de secreción en amnios e incluso mayor en el saco vitelino. El enriquecimiento de ontologías génicas, utilizando datos publicados, señaló varias ontologías comunes en fluidos alantoideos y amnióticos, relacionados con el transporte de oxígeno y hierro, espacio extracelular y unión a receptores de lipoproteínas de alta densidad. En general, el enriquecimiento morfológico y ontológico podría indicar alantoides y diafonía de amnios.

Morphometry of mental foramina applied to local anesthesia in hoary fox (Lycalopex vetulus Lund, 1842) / Morfometría de forámenes mentales aplicada a la anestesia local en zorro de campo común (Lycalopex vetulus Lund, 1842)

In order to perform local anaesthetic blockade of the mental nerves, it is fundamentally to determine anatomical references, including the precise identification of the mental foramina; however, the literature does not present specific data on such structures in the Hoary Fox. Therefore, the objective was describing the morphometry of the mental foramina of this specie, in order to correlate its topographies with the mandibular anatomical reference points, supporting the effective technique for mental desensitization. For this purpose, four mandibles of adult bodies of Lycalopex vetulus were used. Bilaterally, three mental foramina were observed located on the rostral third of the lateral margin of the mandibular body. One of them is more caudal, positioned ventrally to the lower third premolar tooth; a medium one, is located ventrally to the lower first premolar tooth; and a rostral one, placed ventrally to the lower intermediate incisor tooth. There were no statistically significant differences between the antimeres. Therefore, it is indicated that the local anaesthetic block of the mental nerves in this species should be performed by inserting the needle approximately 4.4 mm in a ventrodorsal direction. It is necessary positioning it perpendicularly to the ventral margin of the mandibular body and juxtaposed to its lateral face, using as anatomical reference the interalveolar space located between the first two lower premolar teeth. Thus, that the point established for anaesthetic injection (caudal limit of the ventral margin of the middle mental foramen), provides greater safety for its realization since, for small animals, the recommendation for blockade is represented by needle penetration on the direction of emergence of the mental nerve and artery from this foramen, which makes these structures more exposed to iatrogenic lesions resulting from the technique.

Para realizar el bloqueo anestésico local de los nervios mentales, es fundamental determinar referencias anatómicas, incluida la identificación precisa de los forámenes mentales; sin embargo, la literatura no presenta datos específicos referente a estas estructuras en el zorro de campo común. Por lo tanto, el objetivo fue describir la morfometría de los forámenes mentales de esta especie, para correlacionar sus topografías con los puntos de referencia anatómicos mandibulares, apoyando la técnica efectiva para la desensibilización mental. Para este propósito, se utilizaron cuatro mandíbulas de Lycalopex vetulus adultos. Bilateralmente, se observaron tres resistencias mentales ubicadas en el tercio rostral del margen lateral del cuerpo mandibular. Uno de ellos es más caudal, posicionado ventralmente hacia el tercer diente premolar inferior; uno mediano, localizado ventralmente hacia el primer diente premolar inferior; y uno rostral, colocado ventralmente al diente incisivo intermedio inferior. No se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los antímeros. Por lo tanto, el bloqueo anestésico local de los nervios mentales en esta especie debe realizarse insertando la aguja aproximadamente 4,4 mm en dirección ventrodorsal. Es necesario colocar ésta perpendicularmente al margen ventral del cuerpo mandibular y yuxtapuesto a su cara lateral, utilizando como referencia anatómica, el espacio interalveolar ubicado entre los dos primeros dientes premolares inferiores. De este modo, el punto establecido para la inyección de anestesia (límite caudal del margen ventral del foramen mental medio), proporciona una mayor seguridad para su realización ya que, para los animales pequeños, la recomendación de bloqueo está representada por la penetración de la aguja en la dirección de emergencia del nervio mental y la arteria de este foramen, lo que hace que estas estructuras estén más expuestas a las lesiones iatrogénicas resultantes de la técnica.

Volumetric computed tomography reconstruction, rapid prototyping and 3D printing of opossum head ( Didelphis albiventris ) / Reconstrucción volumétrica por tomografia computarizada, prototipado rápido e impresión 3D de cabeza de zarigüeya ( Didelphis albiventris )

Natural anatomical pieces of wild animals are rare and teachers seek alternatives in satisfactory quantity and quality to inform their students. This article aims to describe the use of multiplanar reconstructions and 3D volume rendering computed tomography (CT) images, rapid prototyping and 3D printing of opossum head to create a biomodel to veterinary education in descriptive anatomy of wild animals. A six-step method study was conducted to construct the biomodel: (1) selection of opossum head from museum; (2) CT scanning of bones structures in veterinary hospital; (3) DICOM visualization medical images in multiplanar reconstructions and 3D volume rendering; (4) .dicom file conversion to .stl; (5) 3D printing of opossum head by rapid prototyping; (6) comparison of 3D model printed with the original anatomical piece. The use of CT images with their different forms of reconstruction can provide a more comprehensive 3D view of opossum craniofacial region and allow a better understanding of head anatomy of this species. The 3D printed biomodel can be a viable alternative to original bone specimens when used in anatomy education. However, further studies must be continued to validate the method in Veterinary Medicine courses.

Las piezas anatómicas naturales de animales salvajes son raras y los profesores buscan alternativas satisfactorias, en cantidad y calidad, para enseñar a sus alumnos. Este artículo tuvo como objetivo describir el uso de la reconstrucción volumétrica por tomografía computarizada, la creación rápida de prototipos y la impresión 3D de la cabeza de zarigüeya para obtener un biomodelo en anatomía descriptiva de animales salvajes para educación veterinaria. Se realizó un estudio en seis pasos para construir el biomodelo: (1) selección de cabeza de zarigüeya del museo; (2) tomografía computarizada de estructuras óseas en hospital veterinario; (3) visualización de las imágenes médicas en DICOM por reconstrucciones multiplanares y renderización de volumen 3D; (4) conversión de archivos .dicom a .stl; (5) impresión 3D de cabeza de zarigüeya mediante prototipado rápido; (6) comparación del modelo 3D impreso con la pieza anatómica original. El uso de imágenes de tomografía computarizada, con sus diferentes formas de reconstrucción, puede proporcionar una vista 3D más completa de la región craneofacial de zarigüeya y permitir una mejor comprensión de la anatomía de la cabeza de esta especie. El biomodelo 3D impreso puede ser una alternativa viable a las muestras óseas originales cuando se utiliza en la educación de la anatomía. Sin embargo, se deben continuar los estudios para validar el método en los cursos de Medicina Veterinaria.

Why to study opossums? / ¿Por qué estudiar las zarigüeyas?

Due to the very important role in Brazilian ecosystems, studying the anatomy of opossums is extremely relevant for their natural preservation and possible clinical and surgical interventions with captive animals. These marsupials occupy diversified niches being well distributed throughout the Brazilian territory. They collaborate in the control of urban and agricultural pests such as rodents and insects. They are also excellent dispersers of seeds through their feces. The conclusion is that opossums can be a great model for the study of the anatomy of wild animals.

Las zarigüeyas desempeñan un papel muy relevante en los ecosistemas brasileños, siendo extremadamente importante estudiar su anatomía para su preservación natural y posibles intervenciones clínicas y quirúrgicas de los animales en cautiverio. Estos marsupiales ocupan nichos diversificados y están bien distribuidos en todo el territorio brasileño. Colaboran en el control de plagas urbanas y agrícolas, como roedores e insectos. También son excelentes dispersores de semillas a través de sus heces. Por lo tanto, se concluye que las zarigüeyas pueden ser un gran modelo para estudiar la anatomía de los animales salvajes.